Engreen-logo

RNA转染技术资料

点击获取->技术资料

目录详情

–>>

第一部分 RNAi实验基本概念

1.RNAi的概念

2.RNAi的启动途径

(1) dsRNA途径

(2) siRNA途径

(3) shRNA表达载体途径

3.非哺乳动物系统的RNAi实验

4.哺乳动物系统的RNAi实验

5.RNAi效应表现

第二部分 RNAi实验具体设计

1.需要短期抑制还是长效抑制?

2.采用siRNA进行实验的途径

3.构建shRNA表达载体进行实验

4.siRNA设计需要注意的问题

(1) siRNA序列设计

(2) 阴性对照的作用

(3) 阳性对照的重要性

(4) siRNA荧光标记的问题

5.脱靶效应

(1) 什么是RNAi Off-target(脱靶效应)?

(2) 脱靶效应如何检测?

(3) siRNA浓度是否和脱靶效应相关?

(4) 转染试剂是否也会造成脱靶效应?

(5) 如何避免脱靶效应?

6.转染是RNAi实验的瓶颈

(1) 选择转染方法的原则

(2) siRNA转染的方法

(3) siRNA转染试剂的主要种类

(4) 脂质体

(5) 非脂质体聚合物类

第三部分 siRNA转染过程相关问题及解答

1.siRNA转染过程相关问题

(1) 转染细胞数量的问题

(2) 转染时siRNA工作浓度

(3) 转染时血清的问题

(4) 转染时抗生素的问题

(5) 转染过程

(6) 转染后换液的问题

(7) 转染条件优化的问题

(8) RNAi效应检测方法

2.siRNA转染疑问解答

点击获取->技术资料