siRNA转染后什么时候做qRT-PCR最好? siRNA转染后什么时候做蛋白检测检测最好?

siRNA转染后什么时候做qRT-PCR最好? siRNA转染后什么时候做蛋白检测检测最好?

1.siRNA转染后什么时候做qRT-PCR检测最好?

siRNA的沉默效果是有时效性的,在最佳的时间点观察,会得到更加明显的沉默效果,这个时间点的确定不能以同一株细胞转染DNA的经验确定,因为一个是消耗mRNA,一个是产生mRNA。对转染siRNA,在核酸水平,转染后8-48小时,即可观察到mRNA水平的逐步下降,一般来说,转染后48小时进行qRT-PCR检测通常会得到漂亮的结果。

2.siRNA转染后什么时候做蛋白检测(如Western Blot)最好?

在mRNA水平下降后,接下来才会有蛋白水平的下降,一般来说,转染后48-72小时进行蛋白检测通常会得到较好的结果。

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