产品介绍
Envirus™-LV 是英格恩生物公司(Engreen Biosystem Co., Ltd. (China))研发的慢病毒感染增强试剂,采用纳米技术合成,通过物理作用将病毒富集在细胞表面,在大幅提高慢病毒感染效率的同时,细胞毒性非常小,不干扰细胞生理功能。
感染时细胞融合度以 50% 左右为宜;慢病毒感染较慢,一般感染 96 小时后观察结果。对 HeLa、293 等分裂活跃的细胞,MOI = 1–3 时 80% 以上的细胞可表达目的基因;原代细胞等非分裂细胞感染效率较低,建议先做 MOI 梯度实验确定最佳 MOI,在此基础上使用增强试剂效果更好。使用时将增强试剂缓慢加入病毒液(顺序不可反),4℃ 静置 15 分钟后加到细胞上。
作用原理
Envirus™不含病毒以及蛋白等其他生物来源成分,不参与病毒和细胞的生理过程。由于Envirus™对病毒的吸附和独有的浓缩功能,通过物理作用将病毒大量富集在细胞表面,大大增加病毒与细胞的接触,最大限度促进病毒感染细胞,通常情况下,比不用增强剂,大幅提高感染效率。同时,由于Envirus™采用纳米技术合成,细胞毒性极低,有效减少细胞死亡。
主要特点
大幅提高病毒感染能力 。
细胞毒性非常小,不干扰细胞生理功能。
方法简单,只需要在常规病毒感染前,病毒提前和增强试剂混合即可,应用方便。
试剂稳定,易保存。

用带GFP的慢病毒感染NK-92细胞。感染后48小时观察结果。从左到右分别是只采用病毒,采用病毒加Polybrene和病毒加Envirus™的情况。

安全性
本品使用安全,未发现任何生物、化学毒性。如不慎沾染,用清水冲洗即可。
质量保证
北京英格恩生物科技有限公司对本产品实行严格质量检验,并进行验证,以确保产品质量。请用户使用前务必认真阅读操作手册。如用户仍然有问题,请立即联系本公司人员,英格恩公司将负责提供全程技术服务。
常见问题
Envirus™-LV 主要用来增强哪种病毒的感染?
它是慢病毒感染增强试剂,属 Envirus™ 系列纳米聚合物病毒感染增强试剂,采用纳米技术合成,能大幅提高慢病毒的感染效率,且细胞毒性很小。
Envirus™-LV 增强效果如何?怎么观察?
它通过吸附浓缩把病毒富集到细胞表面,大幅提高感染效率,同时细胞毒性很小、不干扰细胞生理功能。慢病毒感染较慢,一般感染 96 小时后观察结果;在 Hela、293 等分裂活跃细胞上,MOI=1-3 时多数细胞可表达目的基因。
Envirus™-LV 使用方法复杂吗?
不复杂:建议先做 MOI 梯度实验定最佳 MOI,将增强试剂加入病毒液(顺序不可反)、4℃ 静置约 15 分钟后加到细胞,37℃ 感染;细胞融合度以 50% 左右为宜。
Envirus™-LV 如何运输和储存?有效期多久?
常温运输,4℃ 长期存储,有效期 12 个月。
Envirus™-LV 有哪些规格和货号?
提供 0.5ml(货号 30001-2-0.5)和 1ml(货号 30001-2-1)两种规格。
Envirus™ 各型号怎么按病毒选?我该用 LV 吗?
英格恩 Envirus™ 系列按目标病毒选型:慢病毒用 LV、逆转录病毒用 RV、腺病毒用 AV、腺相关病毒(AAV)用 AAV、动物体内病毒感染用 in vivo、其他病毒或革兰式阴性菌用通用型 Envirus™。
Envirus™-LV 怎么和病毒混合?顺序有要求吗?
有顺序要求。
1)将 Envirus™-LV 用无血清稀释液稀释,充分混匀,制成增强剂稀释液。
2)将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释,充分混匀,制成病毒稀释液。
3)将增强剂稀释液缓慢加入到病毒稀释液中(注意顺序,是增强剂加入到病毒液,不是相反),充分混合,4℃ 静置 15 分钟。
稀释液采用与细胞基础培养基一致的无血清液体,如无血清 DMEM 或 1640。
Envirus™-LV 各规格培养容器用多少?
96 孔板(表面积 0.3cm²):Envirus™-LV 0.5-1.5μl,稀释液 10μl,每孔培养基总量 100μl。
48 孔板(0.7cm²):Envirus™-LV 1-3μl,稀释液 15μl,培养基总量 200μl。
24 孔板(1.9cm²):Envirus™-LV 2.5-7.5μl,稀释液 25μl,培养基总量 500μl。
12 孔板(3.8cm²):Envirus™-LV 5-15μl,稀释液 25μl,培养基总量 1ml。
6 孔板/35mm(10cm²):Envirus™-LV 10-30μl,稀释液 50μl,培养基总量 2ml。
60mm/T25(21cm²):Envirus™-LV 25-75μl,稀释液 125μl,培养基总量 5ml。
100mm(58cm²):Envirus™-LV 75-225μl,稀释液 250μl,培养基总量 15ml。
Envirus™-LV 用量可以加大吗?
可以。在其他条件固定的情况下,增强剂用量在推荐用量的 1-3 倍范围内,用量越大,感染效率越高。
增强效果不明显时可增大用量至 1-3 倍;若出现细胞毒性,适当减少增强剂用量或病毒用量,或增加培养基量。
用 Envirus™-LV 时细胞密度和 MOI 怎么定?
感染时细胞融合度建议在 50% 左右,悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度。
使用增强剂之前应先测定感染细胞的最佳 MOI 值:对分裂活跃的细胞如 HeLa、293,MOI=1~3 时 80% 以上的细胞均表达目的基因;对非分裂细胞如原代细胞,感染效率较低,需要进行 MOI 梯度实验。
在最佳 MOI 值基础上应用增强剂效果更好。
加入 Envirus™-LV 与病毒的混合液后,多久换液、多久看结果?
将混合液加入到含完全培养基的细胞上,37℃ 培养 8 小时后观察细胞状态;如没有明显变化,不要更换培养基,继续培养 24 小时后常规更换培养基。
由于慢病毒感染较慢,一般在感染 96 小时后观察结果。
Envirus™-LV 与病毒的混合液出现沉淀还能用吗?
可以。沉淀是病毒保存液成分析出所致,仍然可以使用,但注意观察细胞毒性;也可立即加入同样的无血清稀释液帮助沉淀溶解。